Caracterização das vias de RNA de interferência na resposta a infecção viral em Lutzomyia longipalpis
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Universidade Federal de Minas Gerais
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Tese de doutorado
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Resumo
O aumento de casos de doenças transmitidas por insetos vetores têm
contribuído cada vez mais com os encargos de saúde pública. O inseto ainda é
o foco para a adoção de estratégias de controle e, para isso é essencial
compreender os mecanismos envolvidos na resposta a infecção. Diversos
estudos já mostraram a participação dos pequenos RNAs não codificadores
(ncRNA), produtos das vias de RNA de interferência (RNAi; miRNA, siRNA e
piRNA), nos processos biológicos do inseto e do papel protetor para algumas
infecções, como por exemplo as causadas por arbovirus. O sequenciamento
dos genomas de alguns insetos vetores facilitou o entendimento de vários
destes mecanismos. Em flebotomíneos, o genoma já foi sequenciado e está
em fase de anotação o que irá auxiliar no desenvolvimento de diversos
estudos. Assim, neste trabalho, nós fizemos a anotação, caracterização e
análises filogenéticas dos genes componentes das vias de RNAi, miRNA,
piRNA e siRNA, em flebotomíneos. Os componentes das vias são conservados
em insetos, sendo observado uma maior divergência entre proteínas das vias
de siRNA e piRNA, que estão envolvidas na proteção antiviral e no controle de
elementos móveis. Como as vias de siRNA e piRNA tem atividade antiviral em
outros insetos, nós também analisamos ncRNAs produzidos em flebotomíneos
após infecção pelo Vesicular stomatitis virus (VSV), um Rhabdovirus
naturalmente transmitido por flebotomíneos na natureza. A análise dos
pequenos ncRNA mostrou que a via de siRNA é a principal ativada após a
infecção. Contudo, os ensaios funcionais para verificar se a via atua como uma
resposta antiviral, sugerem que tratamento com dsRNA estimula, de forma não
específica, a expressão gênica. Isto nos impediu de concluir algo sobre a
funcionalidade desta via durante a infecção. É importante ressaltar que
ncRNAs correspondentes as três vias de RNAi endógenas estão presentes no
flebotomíneo, mesmo sem a infecção pelo vírus. Estudos estão em andamento
para finalizar a caracterização das outras vias de RNAi em flebotomíneos em
comparação aos outros insetos. Estes dados serão de grande uso para a
comunidade.
Abstract
Assunto
Microbiologia, Insetos Vetores, Psychodidae, Interferência de RNA
Palavras-chave
RNA, Flebotomíneos, Insetos vetores