Higher Cytopathic Effects of a Zika Virus Brazilian Isolate from Bahia Compared to a Canadian-Imported Thai Strain
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Universidade Federal de Minas Gerais
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Efeitos citopáticos mais acentuados de um isolado brasileiro do vírus Zika da Bahia em comparação com uma cepa tailandesa importada do Canadá
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Resumo
O vírus Zika (ZIKV) é um patógeno emergente da família Flaviviridae . Representa uma ameaça significativa à saúde global devido à sua patogênese neurológica e fetal (incluindo microcefalia e malformações congênitas) e à sua rápida disseminação pela América Latina nos últimos anos. O vírus se espalhou da África para a Ásia, as ilhas do Pacífico e as Américas, com conhecimento limitado sobre a patogênese associada à infecção nos últimos anos. Neste estudo, comparamos a capacidade da cepa tailandesa PLCal_ZV, importada do Canadá, e do isolado brasileiro HS-2015-BA-01, da Bahia, de produzir partículas infecciosas de ZIKV e efeitos citopáticos em um ensaio de proliferação celular. Também comparamos o acúmulo intracelular de RNA viral das duas cepas por meio de análises de RT-PCR quantitativa (reação em cadeia da polimerase com transcrição reversa). Nossas observações mostram que a cepa HS-2015-BA-01 é mais citopática do que a PLCal_ZV em ensaios de proliferação em células Vero, células renais embrionárias humanas HEK 293T e células de neuroblastoma SH-SY5Y. A RT-PCR quantitativa demonstra que o nível de RNA viral é maior com a cepa HS-2015-BA-01 do que com a PLCal_ZV em duas linhagens celulares, mas semelhante em uma linhagem de células de neuroblastoma. As duas cepas apresentam 13 polimorfismos de aminoácidos e analisamos suas estruturas secundárias proteicas previstas. O aumento da citopatogenicidade e do acúmulo de RNA do isolado brasileiro do ZIKV em comparação com o isolado tailandês pode contribuir para o aumento da patogenicidade observada durante a epidemia no Brasil.
Abstract
Zika virus (ZIKV) is an emerging pathogen from the Flaviviridae family. It represents a significant threat to global health due to its neurological and fetal pathogenesis (including microcephaly and congenital malformations), and its rapid dissemination across Latin America in recent years. The virus has spread from Africa to Asia, the Pacific islands and the Americas with limited knowledge about the pathogenesis associated with infection in recent years. Herein, we compared the ability of the Canadian-imported Thai strain PLCal_ZV and the Brazilian isolate HS-2015-BA-01 from Bahia to produce infectious ZIKV particles and cytopathic effects in a cell proliferation assay. We also compared the intracellular viral RNA accumulation of the two strains by quantitative RT-PCR (reverse transcription polymerase chain reaction) analyses. Our observations show that HS-2015-BA-01 is more cytopathic than PLCal_ZV in proliferation assays in Vero, Human Embryonic Kidney HEK 293T and neuroblastoma SH-SY5Y cells. Quantitative RT-PCR shows that the level of viral RNA is higher with HS-2015-BA-01 than with PLCal_ZV in two cell lines, but similar in a neuroblastoma cell line. The two strains have 13 amino acids polymorphisms and we analyzed their predicted protein secondary structure. The increased cytopathicity and RNA accumulation of the Brazilian ZIKV isolate compared to the Thai isolate could contribute to the increased pathogenicity observed during the Brazilian epidemic.
Assunto
Zika virus, Brasil, Canadá, Tailândia, Efeito citopatogênico viral
Palavras-chave
Zika virus, Predicted protein structure, qRT-PCR, Cytopathicity, Viral titer
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https://www.mdpi.com/1999-4915/10/2/53