Desenvolvimento de um teste imunoenzimático para detecção de anticorpos para o vírus da Doença de Gumboro e comparação com os testes de gel difusão em ágar, soroneutralização e ELISA comercial
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Editor
Universidade Federal de Minas Gerais
Descrição
Tipo
Dissertação de mestrado
Título alternativo
Primeiro orientador
Membros da banca
Jose Sergio de Resende
Maulori Curié Cabral
Maulori Curié Cabral
Resumo
Foi desenvolvido um teste imunoenzimático com finalidade de detecção de anticorpos para o vírus da doença da Gumboro, denominado ELISA-B. Foram trabalhados três tipos de antígenos, dos quais dois foram preparados a partir da sobrenadante de cultivo celular (fibroblastos de embrião de ovos da galinha SPF) infectado com a amostra Lukert do vírus da doença de Gumboro (VDG), sendo que a etapa de produção inicial de ambos foi idêntica, mas diferente na etapa final (um foi produzido por centrifugação e o outro por ultrafiltração). O terceiro antígeno foi produzido a partir de bolsas de Fabrício lesadas provenientes de galinhas SPF infectadas com a amostra BH-83 do VDG. Os antígenos provenientes de cultivo celular geraram resultados insatisfatórios e o antígeno preparado com bolsa de Fabrício produziu bons resultados. O conjugado desenvolvido foi preparado com imunoglobulina G de coelho anti-gamablobulina de galinha acoplada à peroxidase. Os soros padrões controles utilizados (positivo e negativo) foram produzidos em galinhas SPF e testados inicialmente por imunodifusão (AGP). Foram feitos estudos entre as provas da AGP, soroneutralização (SN) e o ELISA-B envolvendo 312 amostras de soros de frangos de corte procedentes de granjas das regiões do Alto São Francisco e Zona Metalúrgica do Estado de Minas Gerais. Entre o ELISA-B, o AGP e a SN foi encontrada uma correlação significativa através do estudo pelo X² (X² = 10,90, P < 0,05). Foram comparados, isoladamente, pelo X², o AGP com ELISA-B e o SN com ELISA-B, o que resultou em diferenças significativas (X² = 7,87, P < 0,05). Ao correlacionar AGP com SN não foi detectado diferença significativa (X² = 5,99). A análise pelo X² entre ELISA-B e o ELISA comercial importado (ELISA-A) não foi possível de ser estabe1ecida, visto que o somatório entre os positivos e negativos foram muito próximos. O ELISA-A com 243 soros examinados apresentou um total de 111 positivos e 132 negativos. O ELISA-B,por sua vez, do mesmo total, apresentou 110 positivos e 133 negativos.
Abstract
Assunto
Veterinária, Bolsa de Fabricius Doenças Diagnostico, Teste imunoenzimático, Ave domestica Doenças
Palavras-chave
Medicina Veterinária