Avaliação de microRNAs na Periodontite Crônica
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Universidade Federal de Minas Gerais
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Tese de doutorado
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Resumo
MicroRNAs (miRNAs) são moléculas de pequenos RNAs que não
codificam proteínas cuja função é regular negativamente a expressão de genes
através de regulação pós transcricional via degradação de RNA mensageiro
alvo ou inibição da tradução do mesmo. Recentemente, alguns estudos têm
demonstrado alterada expressão de miRNAs em várias doenças. No entanto,
há poucos relatos na literatura sobre a expressão de miRNAs em periodontite.
O objetivo desse estudo foi avaliar a expressão de 84 miRNAs em tecidos
gengivais de indivíduos com periodontite crônica (n = 6) e sem a doença (n=4).
Oito miRNAs miRNA-148a-3p, miRNA-142-3p, miRNA-29b, miRNA-138-5p,
miRNA-142-5p, miRNA-150-5p, miRNA-191-5p e miRNA-223-3p estavam
aumentados nas amostras de periodontite crônica (PC). Dentre os miRNAs
avaliados, a expressão miRNA148a-3p estava significantemente aumentada
em todas as amostras PC inicialmente avaliadas em relação ao grupo sem a
doença. Dessa maneira, a expressão gênica do miRNA-148a foi confirmada
por PCR em Tempo Real (RT-qPCR) aumentando-se o número de amostras
avaliadas para n = 17 tanto para o grupo caso quanto o grupo de comparação.
Ao aumentar o número de amostras a quantificação relativa (RQ) média do
miRNA-148a foi 17,24 enquanto o grupo controle 14,05, sendo esse resultado
não estatisticamente significativo. Através da técnica de hibridação in situ
(HIS), observou-se marcação para miRNA-148a, predominantemente, em
tecido conjuntivo de fragmento de gengiva de indivíduos com PC. A expressão
do alvo do miRNA-148a, v-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene
homólogo B (mafB), uma molécula reguladora da osteoclastogênese, foi
avaliada, entretanto o resultado não foi estatisticamente significativo. O
experimento de cultura de células mononucleares de sangue periférico (CMSP)com estímulos periodontopatogênicos demonstrou aumento da expressão de
miRNA-148a quando estimulados com LPS de P. gingivalis e LPS de A.
actinomycetemcomitans, cultivados por quatro horas. Em conclusão, os dados
desse estudo destacam a possibilidade de envolvimento de miRNA-148a na
patogênese da periodontite crônica e sua relação com periodontopatógenos.
Estudos adicionais são necessários para demonstrar uma relação causal entre
o miRNA-148a e seus alvos na PC, assim como seu papel na patogênese e
gravidade da doença.
Abstract
MicroRNAs (miRNAs) are short RNA molecules that negatively regulate
gene expression by degrading target mRNA or inhibit the translation of protein.
Recently, many reports have shown the altered miRNA expression in various
diseases. However, there are few reports about miRNA expression on
periodontitis. Initially, this study aimed to compare the expression of 84 miRNAs
in gingival tissues from individuals without (n=4) and with chronic periodontitis
(n=6). Eight miRNAs miR148a-3p, miR142-3p, miR29b, miR138-5p, miR142
5p, miR150-5p, miR191-5p and miR223-3p were significantly increased in the
samples of chronic periodontitis (CP). Among the increased miRNAs, miRNA
148a-3p expression was higher in CP compared to C group. The miRNA-148a
gene expression was confirmed by RT-qPCR (n=17). Media miRNA-148a
relative quantification (RQ) was 17.24 while control group was 14.05. Through
in situ hybridization (ISH), it was observed positive staining for miRNA-148a
predominantly in connective tissue of gingival fragment with CP. Target of the
miRNA-148a-3p, v-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog B
(MAFB), a regulatory molecule of osteoclastogenesis, was evaluated and its
result did not was statistically significant. The in vitro experiment showed
increase miRNA-148a expression when stimulated with P. gingivalis LPS and A.
actinomycetemcomitans LPS in PBMC cultivated for 4 hour. In conclusion,
these data highlight the possibility of miR-148a involvement in chronic
periodontitis pathogenesis. More studies are necessary to demonstrate a causal
relationship between these miRNA and their target in periodontal diseases, as
well as its role in the pathogenesis and severity of disease.
Assunto
Morfologia, MicroRNAs, Periodontite, Patogênese Homeopática
Palavras-chave
MicroRNAs, Periodontite, Patogênese
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