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http://hdl.handle.net/1843/35053| Type: | Dissertação |
| Title: | Estudo de interação da proteína Pb27 de Paracoccidioides brasiliensis com um ligante nucleotídico e de sua aplicação em um biossensor |
| Authors: | Aline Mendes da Rocha |
| First Advisor: | Ronaldo Alves Pinto Nagem |
| First Co-advisor: | Mariana Amalia Figueiredo Costa |
| First Referee: | Rafael Pinto Vieira |
| Second Referee: | Rafaela Salgado Ferreira |
| Abstract: | A proteína Pb27 de Paracoccidioides brasiliensis é um antígeno que tem sido estudado para a produção de vacinas e no diagnóstico da Paracoccidioidomicose (PCM), principal micose sistêmica da América Latina, cuja importância epidemiológica se deve à extensa área de endemicidade no Brasil, e ao acometimento de trabalhadores rurais em idade ativa. Recentemente, o primeiro modelo de estrutura da Pb27 foi determinado por cristalografia por difração de raios-X, e através de estudos de homologia estrutural a proteína foi classificada como uma nucleotidiltransferase de função desconhecida. Além disso, a triagem virtual de ligantes e estudos de ressonância nuclear magnética identificaram o nucleotídeo citidina trifosfato (CTP) como provável ligante da proteína. A fim de caracterizar quantitativamente a interação da Pb27 com esse nucleotídeo, foram realizados ensaios de interação por supressão de fluorescência de triptofano, fluorimetria diferencial de varredura e calorimetria de titulação isotérmica. Os resultados indicaram uma interação fraca, com constante de dissociação da ordem de 10^-3 M, exotérmica (ΔH = -34,3 KJ/mol) e exergônica (ΔG = -15,9 KJ/mol). Além disto, foram feitos estudos preliminares da utilização da proteína para a detecção de anticorpos anti-Pb27 em um biossensor impedimétrico, para futura utilização no diagnóstico da PCM. Os resultados indicaram o reconhecimento dos anticorpos pela proteína, por análise de espectroscopia de impedância eletroquímica. Porém, ainda são necessários mais estudos para a padronização dos biossensores, e futuros testes com o soro de pacientes. |
| Subject: | Bioquímica Paracoccidioidomicose Nucleotidiltransferase Proteínas recombinantes Técnicas biossensoriais |
| language: | por |
| metadata.dc.publisher.country: | Brasil |
| Publisher: | Universidade Federal de Minas Gerais |
| Publisher Initials: | UFMG |
| metadata.dc.publisher.department: | ICB - DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA E IMUNOLOGIA |
| metadata.dc.publisher.program: | Programa de Pós-Graduação em Bioquímica e Imunologia |
| Rights: | Acesso Restrito |
| URI: | http://hdl.handle.net/1843/35053 |
| Issue Date: | 27-Feb-2020 |
| metadata.dc.description.embargo: | 27-Feb-2021 |
| Appears in Collections: | Dissertações de Mestrado |
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