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http://hdl.handle.net/1843/36180
Type: | Tese |
Title: | Produção de uma proteína quimera usada como alvo vacinal frente à ascaridíase e transformação genética de plantas (Arabidopsis thaliana e Solanum lycopersicum cultivar Micro-Tom) com o gene vacinal |
Authors: | Joseane Camilla de Castro |
First Advisor: | Ricardo Toshio Fujiwara |
First Co-advisor: | Joni Esrom Lima |
First Referee: | Ana Paula Peconick |
Second Referee: | Jacqueline Araújo Fiúza |
Third Referee: | Vitor Luis Tenório Mati |
metadata.dc.contributor.referee4: | Ricardo Nascimento Araujo |
Abstract: | Ascaris lumbricoides e Ascaris suum são parasitos causadores da ascaridíase, doença que leva a quadros de desnutrição e tem grande impacto especialmente no desenvolvimento de crianças infectadas. Ambos os parasitos são capazes de infectar humanos e são por vezes considerados uma única espécie. Estima-se que 800 milhões de pessoas estão infectadas por A. lumbricoides e as medidas profiláticas que visam o controle do mesmo são limitadas, principalmente em regiões endêmicas. Usadas há séculos, as vacinas, são uma estratégia de intervenção que possuem melhor custo- benefício, sendo as recombinantes, uma das mais promissoras contra uma gama de patógenos e tumores. A produção de vacinas em plantas tem sido estudada há algum tempo, apresentando resultados positivos e grandes vantagens. Assim sendo, o presente trabalho visou a produção de uma vacina quimera e linhagens transgênicas de Solanum lycopersicum cv. Micro-Tom e Arabidopsis thaliana expressando de forma ectópica a sequência do antígeno vacinal contra A. suum. Para tanto, foram selecionados epítopos para a construção da proteína quimera. Fêmeas de camundongos BALB/c foram imunizadas e pode- se constatar que animais imunizados com a proteína quimera juntamente com MPLA (Formulação Vacinal) apresentaram uma redução de cerca de 73,54% na carga parasitária em relação ao grupo controle imunizado com PBS. Em análise histopatológica, foi possível verificar uma redução da inflamação no pulmão e do espessamento dos septos no grupo imunizado apenas com a proteína quimera bem como no imunizado com a Formulação Vacinal. O grupo imunizado com a Formulação Vacinal apresentou, ainda, maior produção de IgG do que os demais grupos.Em ELISA foi verificado o reconhecimento da proteína quimera por soro de animais infectados com A. suum. Foi estabelecido um protocolo para a imunização de camundongos com a proteína quimera por via oral, bem como verificada a bioacessibilidade da mesma em digestão in vitro. Plantas de Solanum lycopersicum cv. Micro-Tom e Arabidopsis thaliana foram transformadas geneticamente, obtendo plantas transgênicas na geração T1, com a inserção do gene da proteína quimera, confirmada por PCR e seleção por antibiótico. Por conseguinte, pode-se inferir que a proteína quimera é um bom alvo vacinal frente à infecção por A. suum, sendo seu uso benéfico para o controle da ascaridíase e que a inserção do gene do imunógeno em plantas pode vir a ser um caminho para a produção de vacinas. |
Subject: | Parasitologia Ascaris Vacinas |
language: | por |
metadata.dc.publisher.country: | Brasil |
Publisher: | Universidade Federal de Minas Gerais |
Publisher Initials: | UFMG |
metadata.dc.publisher.department: | ICB - DEPARTAMENTO DE PARASITOLOGIA |
metadata.dc.publisher.program: | Programa de Pós-Graduação em Parasitologia |
Rights: | Acesso Aberto |
URI: | http://hdl.handle.net/1843/36180 |
Issue Date: | 29-Apr-2021 |
Appears in Collections: | Teses de Doutorado |
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