Please use this identifier to cite or link to this item:
http://hdl.handle.net/1843/44235
Type: | Artigo de Periódico |
Title: | Both knock-down and overexpression of Rap2a small GTPase in macrophages result in impairment of NF-κB activity and inflammatory gene expression |
Other Titles: | Tanto o knock-down quanto a superexpressão de Rap2a small GTPase em macrófagos resultam em comprometimento da atividade de NF-κB e expressão de genes inflamatórios |
Authors: | Brener Carvalho Aristóbolo Silva Leonardo Oliveira Carolina Rocha Heliana de Barros Fernandes Isadora Oliveira Felipe Leão Thalita Valverde Igor Rego Sankar Ghosh |
Abstract: | Small Ras GTPases are key molecules that regulate a variety of cellular responses in different cell types. Rap1 plays important functions in the regulation of macrophage biology during inflammation triggered by toll-like receptors (TLRs). However, despite sharing a relatively high degree of similarity with Rap1, no studies concerning Rap2 in macrophages and innate immunity have been reported yet. In this work, we show that either way alterations in the levels of Rap2a hampers proper macrophages response to TLR stimulation. Rap2a is activated by LPS in macrophages, and although putative activator TLR-inducible Ras guanine exchange factor RasGEF1b was sufficient to induce, it was not fully required for Rap2a activation. Silencing of Rap2a impaired LPS-induced production of IL-6 cytokine and KC/Cxcl1 chemokine, and also NF-κB activity as measured by reporter gene studies. Surprisingly, overexpression of Rap2a did also lead to marked inhibition of NF-κB activation induced by LPS, Pam3CSK4 and downstream TLR signaling molecules. We also found that Rap2a can inhibit the LPS-induced phosphorylation of the NF-κB subunit p65 at serine 536. Collectively, our data suggest that expression levels of Rap2a in macrophages might be tightly regulated to avoid unbalanced immune response. Our results implicate Rap2a in TLR-mediated responses by contributing to balanced NF-κB activity status in macrophages. |
Abstract: | Pequenas Ras GTPases são moléculas-chave que regulam uma variedade de respostas celulares em diferentes tipos de células. Rap1 desempenha funções importantes na regulação da biologia dos macrófagos durante a inflamação desencadeada por receptores do tipo toll (TLRs). No entanto, apesar de compartilhar um grau relativamente alto de semelhança com Rap1, nenhum estudo sobre Rap2 em macrófagos e imunidade inata foi relatado ainda. Neste trabalho, mostramos que, de qualquer forma, alterações nos níveis de Rap2a dificultam a resposta adequada dos macrófagos à estimulação de TLR. Rap2a é ativado por LPS em macrófagos e, embora o fator de troca de guanina Ras induzível por TLR putativo RasGEF1b tenha sido suficiente para induzir, não foi totalmente necessário para a ativação de Rap2a. O silenciamento de Rap2a prejudicou a produção induzida por LPS de citocina IL-6 e quimiocina KC/Cxcl1, e também a atividade de NF-κB medida por estudos do gene repórter. Surpreendentemente, a superexpressão de Rap2a também levou à inibição marcada da ativação de NF-κB induzida por LPS, Pam3CSK4 e moléculas de sinalização TLR a jusante. Também descobrimos que Rap2a pode inibir a fosforilação induzida por LPS da subunidade NF-κB p65 na serina 536. Coletivamente, nossos dados sugerem que os níveis de expressão de Rap2a em macrófagos podem ser fortemente regulados para evitar resposta imune desequilibrada. Nossos resultados implicam Rap2a em respostas mediadas por TLR, contribuindo para o status de atividade de NF-κB equilibrado em macrófagos. |
Subject: | Macrófago Rap GTPase Rap2 NF-κB Receptor tipo Toll |
language: | eng |
metadata.dc.publisher.country: | Brasil |
Publisher: | Universidade Federal de Minas Gerais |
Publisher Initials: | UFMG |
metadata.dc.publisher.department: | ICB - INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOLOGICAS |
Rights: | Acesso Restrito |
metadata.dc.identifier.doi: | 10.1016/j.molimm.2019.02.015 |
URI: | http://hdl.handle.net/1843/44235 |
Issue Date: | 2019 |
metadata.dc.url.externa: | https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0161589018307612?via%3Dihub |
metadata.dc.relation.ispartof: | Molecular Immunology |
Appears in Collections: | Artigo de Periódico |
Files in This Item:
There are no files associated with this item.
Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.