A new sensitive molecular marker for Aspergillus’ Calmodulin gene detection in biological samples, used as a supplementary diagnosis for invasive Aspergillosis (IA)

Abstract

Introdução: A Aspergilose é causada pelos fungos do gênero Aspergillus. Após a inalação, a conidia do Aspergillus pode invadir o brônquio traqueal e os pulmões, resultando em colonização das vias aéreas, granuloma inflamatório e aspergilose invasiva (AI), que é mais provável que ocorra em pacientes neutropênicos e imunossuprimidos. Atualmente, a IA tem sido associada à COVID-19 em pacientes admitidos em unidades de terapia intensiva (UTI) por períodos mais longos de tempo. Objetivo: O objetivo disto é projetar um novo marcador molecular para detecção de Aspergillus spp. em amostras biológicas, a fim de desenvolver uma nova técnica para diagnóstico de IA que seja mais rápida, mais eficiente e mais segura. Metodologia: O primer foi projetado em silico utilizando seqüências conservadas do gene Calmodulin. Após a confirmação dos resultados em silico, a avaliação in vitro foi realizada utilizando a técnica de PCR. Resultados: O primer projetado mostrou uma alta especificidade para as espécies Aspergillus. Conclusão: Neste estudo, a reação PCR padronizada com o marcador projetado provou ser utilizada com segurança como um método de diagnóstico para IA. O desenvolvimento de um teste para auxiliar no diagnóstico da IA é de grande importância, uma vez que os métodos tradicionais, por sua vez, são demorados e geralmente confundidos com outras doenças. O diagnóstico precoce contribui para o início mais rápido do tratamento e aumenta a chance de sobrevivência do paciente. Podemos concluir que a PCR padronizada com o primer projetado pode ser usada com segurança no desenvolvimento de um teste diagnóstico para IA, sendo de baixo custo e acessível aos pacientes tratados pelo sistema de saúde pública. Foi apresentado um pedido de patente para este marcador molecular, com o número BR1020190281294.