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http://hdl.handle.net/1843/81907
Type: | Dissertação |
Title: | Diagnóstico de infecção pelo vírus da leucemia felina (felv) a partir de elisa indireto utilizando peptídeos sintéticos. |
Authors: | Fernando Araújo Protzner de Oliveira |
First Advisor: | Jenner Karlisson Pimenta dos reis |
First Referee: | Cláudia Fideles Resende |
Second Referee: | Fabiana Alves |
Abstract: | A leucemia felina, doença infecciosa que afeta gatos e felinos selvagens em todo mundo, apresenta diagnóstico desafiador devido a complexidade de sua patogênese. O controle do vírus causador da doença, o vírus da leucemia felina (FeLV), que pertence a família Retroviridae, se estabelece a partir da identificação de animais infectados e de sua segregação. Na rotina a detecção da infecção pelo vírus é feita principalmente pela proteína p27 a partir de teste imunocromatográfico, porém este é capaz de detectar apenas animais no curso mais grave da doença, o curso progressivo. Mesmo empregando um teste mais sensível, a polymerase chain reaction (PCR), de forma associada, ainda se vê a necessidade de se desenvolver um novo método diagnóstico para detectar, de forma mais adequada, a infecção pelo vírus em todos os cursos (abortivo, regressivo, progressivo). Nesse sentido, o presente estudo tem como objetivo desenvolver um ELISA indireto utilizando peptídeos sintéticos, selecionados a partir da técnica de Spot Synthesis, sendo essa uma alternativa para auxiliar no diagnóstico da leucemia felina. Para tanto, foram empregadas técnicas inovadoras que envolvem o uso da biotecnologia. O Spot Synthesis é uma metodologia que a partir da sintetize de peptídeos em membrana de celulose é possível a caracterização e o mapeamento de epítopos imunodominantes. Associada a essa técnica, o emprego de programas de computador (Image J e Microsoft Excel) permite a seleção de peptídeos mais imunogênicos, a serem utilizados como antígeno em um ELISA indireto. Neste estudo, foram selecionados 31 peptídeos, e destes apenas 9 (F1 a F9) foram escolhidos para serem sintetizados na forma solúvel. A melhor leitura do ELISA, em padronização, foi obtida a partir dos peptídeos F5 e F6, que correspondem a proteína p30 codificada pelo gene gag do FeLV. Ao realizar a validação deste ELISA indireto, a leitura de densidade optica (DO) revelou uma resposta heterogênea, mostrando também uma não diferenciação entre amostras positivas e negativas em testes de referência. Porém, estes resultados ainda inspiram maior investigação, tendo em vista, também, o comportamento apresentado neste ELISA em relação aos outlier’s. Os outlier’s são caracterizados, nesse estudo, como amostras com valores de DO discrepantes entre 0,240 e 0,950. Mediante os resultados apresentados, os quais se mostraram promissores, é incentivada a continuidade do estudo, para aprimorar ainda mais o diagnóstico em desenvolvimento e, por consequência, a detecção da infecção por FeLV. |
language: | por |
metadata.dc.publisher.country: | Brasil |
Publisher: | Universidade Federal de Minas Gerais |
Publisher Initials: | UFMG |
metadata.dc.publisher.department: | VET - DEPARTAMENTO DE MEDICINA VETERINÁRIA PREVENTIVA |
metadata.dc.publisher.program: | Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal |
Rights: | Acesso Aberto |
metadata.dc.rights.uri: | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/pt/ |
URI: | http://hdl.handle.net/1843/81907 |
Issue Date: | 28-Feb-2025 |
Appears in Collections: | Dissertações de Mestrado |
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