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http://hdl.handle.net/1843/BUOS-8PGJDY| Type: | Dissertação de Mestrado |
| Title: | Produção e caracterização de painel de anticorpos monoclonais e identificação de antígenos de Babesia bovis |
| Authors: | Joely Ferreira Figueiredo |
| First Advisor: | Lygia Maria Friche Passos |
| First Referee: | Mucio Flavio Barbosa Ribeiro |
| Second Referee: | Maria Sonia Martins |
| Third Referee: | Ricardo Wagner de Almeida Vitor |
| Abstract: | A babesiose bovina, causada pelas espécies Babesia bovis e Babesiabigemina, constitui fator limitante para o desenvolvimento da pecuáriabrasileira. As variedades climática e topográfica deste país implicamdiversas situações epidemiológicas, que podem ser mensuradas através de testes imunodiagnósticos. Com o intuito de identificar antígenos de Babesia bovis para uso potencial em testes imunodiagnósticos, um painel de anticorpos monoclonais foi produzido e caracterizado através de reação de imunofluorescência indireta (RIFI), ELISA e Western , blotting. Após a fusão celular, os híbridos resultantes foram selecionados por RIFI, clonados, mantidos em cultivo celular ecriopreservados em nitrogênio liquido. Doze clones produtores deanticorpos monoclonais reagiram com merozoíto todo de B. bovis,cinco reagiram com superfície de merozoito e somente um clone reagiucom região polar de merozoito. Em ELISA todos os anticorposmonoclonais apresentaramse positivos, sendo observada variação dedensidade óptica de 0,365 a 0,502 (cutof`f : 0,022). As bandasprotéicas reconhecidas pelos anticorpos monoclonais apresentarampesos moleculares aproximados entre 162 a I9 kDa. Quatro clones reconheceram apenas um polipeptídio (73 l·;Da), e outros quatro não seligaram em nenhum polipeptídio em Westem blotting. Esses antígenosidentificados possibilitarão o desenvolvimento de testes diagnósticosmais sensíveis e específicos para estudos epidemiológicos, bem como a sua utilização como imunógenos na imunoprofilaxia da babesiosebovina no Brasil. |
| Abstract: | With the aim of identifying antigens of Babesia bovis, with potencialuse in immunodiagnostic tests, a panel of monoclonal antibodies wasproduced and characterized by the indirect fluorescent antibody test,ELISA and Westem blotting. The resultant hybrids, after fusion wereselected by the indirect fluorescent antibody test, cloned, maintained in vitro culture and cryopresewed in liquid nitrogen. Twelve clonesproducing monoclonal antibodies reacted against merozoites, while fivereacted on the surface of merozoites and one clone reacted against the ,polar region of merozoites. All monoclonal antibodies reacted inELISA. with optical density varying Som 0.365 to 0.502 (cut-off =0.022). The bands recognized by the monoclonal antibodies in Westemblotting had molecular weights ranging from 162 to 19 kDa. Fourclones recognized only one band of 73 l<.Da and the other did not reactin Westem blotting. These antigens will be usetiil for the developmentof more sensitive and especific immunodiagnostic tests for use inepidemiological studies on bovine babesiosis in Brazil. |
| Subject: | Ensaio imunoenzimatico Babesiose em bovino Anticorpos monoclonais Imunofluorescência |
| language: | Português |
| Publisher: | Universidade Federal de Minas Gerais |
| Publisher Initials: | UFMG |
| Rights: | Acesso Aberto |
| URI: | http://hdl.handle.net/1843/BUOS-8PGJDY |
| Issue Date: | 13-Jun-1997 |
| Appears in Collections: | Dissertações de Mestrado |
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