Investigação molecular da infecção por mayaro vírus em primatas não humanos no estado de Minas Gerais (2017-2020) e otimização de teste de neutralização viral alternativo para investigação da infecção por mayaro vírus.
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Universidade Federal de Minas Gerais
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Dissertação de mestrado
Título alternativo
Molecular investigation of mayaro virus infection in non-human primates in the state of Minas Gerais (2017-2020) and optimization of an alternative viral neutralization test for investigation of mayaro virus infection
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Resumo
O Mayaro virus (MAYV; gênero Alphavirus, família Togaviridae) é o agente etiológico
causador da febre do Mayaro, uma doença caracterizada por sinais clínicos como febre, dor nas
articulações e exantema. O MAYV é transmitido a primatas não humanos (PNH) pela picada
de fêmeas de mosquitos do gênero Haemagogus spp. que, por sua vez, também podem
transmitir o vírus a humanos, que se tornam hospedeiros acidentais num fenômeno conhecido
como spillover. No Brasil, o MAYV e o yellow fever virus (YFV), causador da febre amarela
(FA), compartilham vetores e hospedeiros, além de apresentarem sobreposição de áreas onde
circulam. Nesse contexto, este trabalho visa a investigar a presença do genoma de MAYV em
amostras de PNH coletadas durante os recentes surtos de febre amarela no estado de Minas
Gerais e otimizar um ensaio de neutralização viral (PRNT) com a utilização de amostras de
fígado de animais experimentais substituindo soro para investigar a infecção por MAYV. Para
a investigação molecular, foram testadas, pelo método de reação em cadeia da polimerase
(PCR), 732 amostras de fígado de PNH de vida livre para detecção de região do genoma de
MAYV. Para a padronização do teste de neutralização, foram utilizadas amostras de fígado de
animais experimentais em substituição ao soro em protocolo adaptado de PRNT. Não foi
possível detectar a presença do genoma de MAYV nas amostras de fígado de PNH. Foi
observada neutralização em amostras de animais experimentais infectados, o que não foi
observado, na mesma proporção, em animais não infectados. A técnica de neutralização viral
adaptada nesse trabalho se mostrou promissora para uso na investigação da presença de
anticorpos neutralizantes em amostras de fígado obtidas de carcaças, e poderá ser de grande
valia para os esforços de vigilância epidemiológica de arbovírus no país. A não detecção de
genoma de MAYV nas amostras de fígado de PNH não exclui a possibilidade de circulação, ou
mesmo de introdução futura do vírus em MG, sendo necessário um trabalho de vigilância
continuado para monitoramento de eventuais surtos.
Abstract
Mayaro virus (MAYV; genus Alphavirus, family Togaviridae) is the etiologic agent causing
Mayaro fever, a disease characterized by clinical signs such as fever, joint pain, and exanthema.
MAYV is transmitted to non-human primates (NHP) by the bite of female mosquitoes of the
genus Haemagogus spp. which, in turn, can also transmit the virus to humans, who become
accidental hosts in a phenomenon known as spillover. In Brazil, MAYV and yellow fever virus
(YFV), which causes yellow fever (YF), share vectors and hosts, besides presenting
overlapping areas where they circulate. In this context, this work aims to investigate the
presence of MAYV genome in samples of NHP collected during recent outbreaks of yellow
fever in the state of Minas Gerais and to optimize a viral neutralization assay (PRNT) using
liver samples from experimental animals as a serum substitute to investigate MAYV infection.
For the molecular investigation, 732 liver samples from free-living NHP were tested by
polymerase chain reaction (PCR) for the detection of a MAYV genome region. For the
standardization of the neutralization test, liver samples from experimental animals were used
in place of serum in an adapted PRNT protocol. The presence of the MAYV genome could not
be detected in NHP liver samples. Neutralization was observed in samples from experimental
animals, which was not observed to the same extent in uninfected animals. The viral
neutralization technique adapted in this work showed promise for use in the investigation of the
presence of neutralizing antibodies in liver samples obtained from carcasses and may be of
great value for epidemiological surveillance efforts of arboviruses in the country. The nondetection of MAYV genome in liver samples from PNH does not exclude the possibility of
circulation, or even future introduction of the virus in MG, requiring continued surveillance
work to monitor any outbreaks.
Assunto
Microbiologia, Alphavírus, Sorologia, Epidemiologia, Arbovirus
Palavras-chave
Mayaro virus, primatas não humanos, PRNT, sorologia, epidemiologia, arbovírus, neutralização viral