Proteção vacinal por Leishmania infantum com o uso da proteína de ligação guanosina -5'- trifosfato (GTP) recombinante associada à micelas poliméricas á base de poloxamer 407
Carregando...
Data
Autor(es)
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Universidade Federal de Minas Gerais
Descrição
Tipo
Dissertação de mestrado
Título alternativo
Primeiro orientador
Membros da banca
Grasiele de Sousa Vieira Tavares
Fernanda Ludolf Ribeiro de Melo
Daniela Pagliara Lage
Vivian Tamietti Martins
Eduardo Antônio Ferraz Coelho
Fernanda Ludolf Ribeiro de Melo
Daniela Pagliara Lage
Vivian Tamietti Martins
Eduardo Antônio Ferraz Coelho
Resumo
As leishmanioses são doenças endêmicas em 98 países no mundo, com cerca de mais de 1
bilhão de pessoas em risco de infecção pelo parasito Leishmania. Estas doenças podem ser
divididas em dois grandes grupos de acordo com as manifestações clínicas: a leishmaniose
tegumentar (LT) e a leishmaniose visceral (LV). Embora apresentem incidência mundial, as
leishmanioses são consideradas doenças negligenciadas e não há medidas de controle efetivas
contra esse complexo de doenças. Dessa forma, o desenvolvimento de vacinas profiláticas
capazes de induzir imunidade protetora contra a infecção pelo parasito poderia ser considerado
como uma forma de controle contra a disseminação da doença. Neste trabalho, uma proteína do
parasito Leishmania, denominada proteína guanosina 5’-trifosfato (GTP), que foi identificada
em um estudo imunoproteômico prévio desenvolvido pelo grupo, foi avaliada como candidata
à vacina em camundongos BALB/c contra a infecção por Leishmania infantum. A proteína foi
usada na versão recombinante (rGTP) e associada à saponina (Sap) ou em micelas poliméricas
(Mic) como adjuvantes. Os resultados mostraram que ambas as associações rGTP/Sap e
rGTP/Mic induziram uma resposta imune do tipo Th1 nos animais vacinados, com níveis
significativamente elevados IFN-γ, IL-12, IL-2, TNF-α, GM-CSF, nitrito, além de anticorpos
do isotipo IgG2a e linfoproliferação positiva, quando comparados aos grupos controle (salina,
saponina e micelas vazias). A resposta imune antes e após a infecção foi acompanhada de uma
carga parasitária significativamente menor encontrada nos animais vacinados com rGTP/Sap e
rGTP/Mic (65% e 85%), quando seus baços, fígados, medulas ósseas e linfonodos drenantes
foram avaliados. Os dados mostraram que a imunização com rGTP/Mic induziu uma resposta
do tipo Th1 mais polarizada e maior redução do parasitismo orgânico, quando comparado aos
demais grupos. Em conclusão, a proteína rGTP apresentou resultado satisfatório na indução de
proteção contra a LV murina e coloca-se como candidata a ser avaliada em futuros estudos em
outros modelos mamíferos.
Abstract
Leishmaniases are endemic diseases in 98 countries worldwide, with over 1 billion people at
risk of infection by the Leishmania parasite. They can be divided into two main groups
according to clinical manifestations: tegumentary leishmaniasis (TL) and visceral leishmaniasis
(VL). Although they have a worldwide incidence, leishmaniasis are neglected diseases and
there are no effective control measures against them. Thus, the development of prophylactic
vaccines capable of inducing protective immunity against infection by the parasite could be
considered as a measure of control against the spread of the disease. In this work, a Leishmania
parasite protein called guanosine 5'-triphosphate (GTP) protein, which was identified in a
previous immunoproteomic study developed by the group, was evaluated as vaccine candidate
in BALB/c mice against Leishmania infantum infection. The protein was used in the
recombinant version (rGTP) and it was associated with saponin (Sap) or in polymeric micelles
(Mic) as adjuvants. Results showed that both rGTP/Sap and rGTP/Mic compositions induced a
Th1-type immune response in the vaccinated animals, with significantly elevated levels of IFNγ, IL-12, IL-2, TNF-α, GM-CSF, nitrite, in addition to IgG2a isotype antibodies and positive
lymphoproliferation; when compared to data found in the control groups (saline, saponin and
empty micelles). The immune response before and after infection was accompanied by a
significantly lower parasite load found in animals vaccinated with rGTP/Sap and rGTP/Mic;
when their spleens, livers, bone marrows and draining lymph nodes were evaluated. Results
showed that rGTP/Mic immunization induced a more polarized Th1-type response and a higher
reduction in organic parasitism, when compared to the other groups. In conclusion, rGTP
showed satisfactory results in inducing protection against murine VL and could be considered
as a candidate to be evaluated in future studies in other mammalian models.
Assunto
Vacinas, Leishmaniose Visceral, Proteínas Recombinantes, Adjuvantes de Vacinas, Proteômica/métodos, Guanosina 5'-O-(3-Tiotrifosfato)
Palavras-chave
Vacinas, leishmaniose visceral, proteínas recombinantes, adjuvantes, imunoproteômica, Proteína guanosina 5’-trifosfato