Expressão da Rho1 GTPase de Schistosoma mansoni em células dentríficas murinas
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Editor
Universidade Federal de Minas Gerais
Descrição
Tipo
Dissertação de mestrado
Título alternativo
Primeiro orientador
Membros da banca
Maria de Fatima Martins Horta
Walderez Ornelas Dutra
Walderez Ornelas Dutra
Resumo
As células dendríticas possuem um papel determinante na indução de resposta imune primária. Estudos recentes tem demonstrado o papel importante destas células na indução de imunidade específica a doenças parasitárias, dente elas a esquistossomose. Este fato despertou grande interesse do nosso grupo na manipulação de células dendríticas para desenvolver uma vacina celular que tem como objetivo induzir imunidade protetora contra o Schistosoma mansoni. Células dendríticas viáveis foram obtidas a partir do cultivo de precursores da medula óssea murina na presença das citocinas GM-CSF e IL-4. Em média, obteve-se por preparação 3 x 106 células/camundongo com morfologia típica. Destas, 77% conservam a capacidade intrínsica fagocítica. Na presença de LPS, observa-se um aumento de 78% do metabolismo celular, fato indicativo da transição do estado imaturo para o maturo. As células dendríticas foram transfectadas com plasmídeo contendo sequência codificadora para o antígeno Rho1 GTPase de Schistosoma mansoni. Esta proteína foi selecionada por ensaio de ELISA de uma biblioteca de cDNA de verme adulto, fato indicativo de seu potencial antigênico. Nosso modelo, permite a obtenção em torno de 105 a 106 células dendríticas transfectadas. Através de ensaios de imunofluorescência demonstrou-se o processamento e apresentação do antígeno recombinante na membrana dessas células. Estes resultados indicam novas perspectivas na utilização das células dendríticas transfectadas na indução de resposta imune protetora contra a esquistossomose em processos de imunização.
Abstract
Assunto
Schistosoma mansoni, Bioqúimica, Células dendríticas
Palavras-chave
Schistosoma mansoni, GTPase, Murinas