Participacao do transporte de acetilcolina, docalcio intracelular e do colesterol de membranano ciclo de vesiculas sinapticas em junçãoneuromuscular

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Universidade Federal de Minas Gerais

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Dissertação de mestrado

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Primeiro orientador

Membros da banca

Maria Julia Marques
Vivaldo Moura Neto
Elizabeth Ribeiro da Silva
Ligia Araujo Naves Kushmerick

Resumo

A biogenese e reciclagem de vesiculas sao etapas fundamentais paramanutencao da neurotransmissao, impedindo que ocorra reducao dos aglomeradosvesiculares e bloqueio da funcao sinaptica. Utilizando preparacoes de juncaoneuromuscular de camundongo e de ra, tres importantes aspectos envolvendo o ciclo devesiculas sinapticas foram abordados neste trabalho de tese: 1) as consequencias dealteracoes na expressao do transportador vesicular de acetilcolina (VAChT) sobre ociclo sinaptico; 2) a participacao de estoques intracelulares de calcio na exocitose devesiculas sinapticas induzida pela ouabaina; e 3) a importancia do colesterol demembrana na biogenese e reciclagem de vesiculas sinapticas. Os resultados obtidosmostraram que a reducao na expressao do gene do VAChT nao determinou alteracoescompensatorias no numero e na area de terminacoes motoras presentes no diafragma decamundongos VAChT knockdown. Alem disso, o numero de vesiculas aptas para areciclagem bem como os passos de exo/endocitose estavam preservados nos animaisknockdown homozigotos. Contudo, a ausencia de expressao do VAChT leva ao aumentocompensatorio no numero e na area de terminacoes motoras dos animais nocaute,sugerindo que a liberacao de acetilcolina armazenada em vesiculas via VAChT eessencial para o desenvolvimento normal de terminacoes motoras. Quanto aparticipacao do calcio intracelular na exocitose evocada pelo derivado esteroideouabaina, os dados revelam que, embora a ouabaina iniba a endocitose, este glicosideocardiotonico promove liberacao vesicular mobilizando calcio armazenado no reticuloendoplasmatico e nas mitocondrias via receptores de rianodina e trocador Na+/Ca2+mitocondrial, respectivamente. Na investigacao sobre o papel do colesterol na biogenesee reciclagem de vesiculas sinapticas, os resultados indicam que o sequestro do colesterolde membrana aumenta a liberacao espontanea de vesiculas sinapticas, altera a amplitudee cinetica de eventos em miniatura, porem inibe a exocitose evocada pelo KCl e aendocitose compensatoria. Os dados obtidos com as investigacoes supracitadascontribuem para obtencao de principios fundamentais sobre o funcionamento do sistemacolinergico e neurotransmissao em geral, podendo, no futuro, subsidiar meios paraintervencao farmacologica em disfuncoes da transmissao sinaptica central e periferica.

Abstract

Assunto

Junção neuromuscular, Vesícula, Biologia Celular, Endocitose, Exocitose

Palavras-chave

vesiculas sinapticas

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