Expressão de citocinas em resposta à infecção endodôntica experimental em camundongos isentos de germes
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Editor
Universidade Federal de Minas Gerais
Descrição
Tipo
Dissertação de mestrado
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Primeiro orientador
Membros da banca
Frank Ferreira Silveira
Paula Rocha Moreira
Paula Rocha Moreira
Resumo
Objetivo: Avaliar, em um modelo de camundongo gnotoxênico, o perfil da expressão de citocinas que modulam o desenvolvimento de lesões periapicais em resposta à sinergia de patógenos humanos.Metodologia: Os microrganismos isolados de um paciente, sabidamente sinérgicos, in vitro, foram inoculados em canais radiculares de camundongos isentos de germes (cepas de Fusobacterium nucleatum e Peptostreptococcus prevotii) em mono ou em biassociação. Os animais foram sacrificados no 7o e 14o dia após a infecção, e os tecidos periapicais coletados. Avaliou-se a expressão das citocinas IFN-, TNF-, RANKL, IL-10, IL-4 e TGF- por meio do PCR quantitativo em tempo real. Resultados: As expressões do RNAm de IFN- e TNF- foram significativamente maiores no grupo monoinfectado com F. nucleatum na fase aguda e crônica do desenvolvimento das lesões periapicais, respectivamente. No entanto, com estímulos F. nucleatum e P. prevotii no grupo bi-infectado, observou-se pequena expressão de IFN- e TNF- em ambos os momentos analisados. A expressão do RNAm do RANKL diminuiu pelos estímulos biassociados em fase crônica (14 dias). IL-4 não estaria envolvida na resposta imune periapical a essas infecções, pois sua expressão foi similar em ambos os períodos analisados. A citocina IL-10 expressou-se mais na fase crônica (14 dias), pelos grupos monoinfectados com F. nucleatum e P. prevotii. Os estímulos da biassociação (F. nucleatum e P. prevotii) aumentaram a expressão de TGF- no 7o dia, relacionando-se com a baixa expressão de IFN- e TNF- na mesma condição, ao mesmo tempo. Além disso, F. nucleatum em monoinfecção aumentou a expressão de TGF- na fase crônica. Conclusão: Pode-se concluir que o perfil de citocinas expresso nos tecidos periapicais, em resposta à infecção de canais radiculares, depende do desafio bacteriano, pois ambas as espécies selecionadas induziram uma resposta específica no hospedeiro. Além disso, as citocinas, TGF- e IL-10, devem regular as respostas imunes pró-inflamatórias, na fase aguda e crônica das respostas periapicais, respectivamente.
Abstract
Aim: To examine the cytokine expression profile during periapical lesion development in response to synergetic human pathogens in a gnotoxenic mouse model. Methodology: Fisobacterium nucleatum and Peptostreptococcus prevotii strains were isolated from a human patient and had been previously demonstrated to be synergistic in vitro, because P. prevotii triggered a significant increase in the growth of F. nucleatum. These strains were inoculated into the root canals of germ-free mice in either mono- or bi-association. Animals were sacrificed seven and 14 days after infection, and periapical tissues were collected. mRNA Expression of the cytokines IFN-, TNF-, RANKL, IL-10, IL-4, and TGF- was assessed using quantitative real-time PCR. Results: The mRNA expression of IFN- and TNF- was significantly up-regulated by F. nucleatum mono-infection during the acute and chronic phase of periapical lesion development, respectively. However, in F. nucleatum and P. prevotii bi-infection the expression of IFN- and TNF- were almost absent at both time points analysed. RANKL mRNA expression was down-regulated during the bi-infection at the chronic phase (day 14). As IL-4 expression was similar at both time points analysed, IL-4 does not appear to be involved in the periapical immune response to these bacterial strains. The immunomodulatory cytokine IL-10 was up-regulated during the chronic phase (day 14) by mono-infection with either F. nucleatum or P. prevotii. Dual infection with F. nucleatum and P. prevotii increased TGF- mRNA expression on day 7, which paralleled the decrease in IFN- and TNF- mRNA levels at the same time point. Additionally, F. nucleatum mono-infection increased TGF- mRNA expression during the chronic phase. Conclusion: We conclude that the cytokine profile expressed in periapical tissues in response to root canal infection depends on the nature of the bacterial challenge because we observed species-specific host cytokine responses. Additionally, both TGF- and IL-10 appeared to be regulating the proinflammatory cytokine responses during both the acute and chronic phases of the periapical immune response.
Assunto
Tratamento do canal radicular, Doenças periapicais, Vida livre de germes, Citocinas
Palavras-chave
citocinas, Endodontia