Immunogenic mapping of rDyn-1 and rKDDR-plus proteins and selection of oligopeptides by immunoblotting for the diagnosis of Leishmania infantum-infected dogs

Abstract

Endêmica no Brasil, a leishmaniose visceral (LV) é uma infecção zoonótica que está entre as mais importantes doenças parasitárias transmitidas por vetores. Os cães são os principais reservatórios da leishmaniose canina (LCa) e sua identificação é utilizada em alguns países como parte das medidas de prevenção e controle de doenças na população canina e humana. Nesse contexto, são necessários testes sorológicos, compostos por antígenos capazes de identificar corretamente os cães infectados, minimizando o número de casos falso-negativos. Este estudo teve como objetivo identificar mais peptídeos imunorreativos derivados de duas proteínas inteiras previamente descritas (rDyn-1 e rKDDR-plus) e comparar seu desempenho aos antígenos controle rK39 e ao extrato bruto para a detecção de cães infectados com L. infantum, especialmente os assintomáticos. Os três peptídeos selecionados e uma mistura deles, juntamente com os antígenos rDyn-1, rKDDR-plus, rK39 e extrato bruto foram avaliados usando ELISA indireto com amostras de soros de 186 cães com CanL, sendo assintomáticos (n = 50), sintomáticos (n = 50), coinfectados (n = 19), infectados com Babesia sp. (n = 7), Ehrlichia sp. (n = 6), T. cruzi (n = 20) e não infectados (n = 34). Os resultados mostraram que a proteína rDyn-1 e a mistura de peptídeos apresentaram a maior sensibilidade (100% e 98,32%, respectivamente) e especificidade (97,01 e 98,51, respectivamente). Um alto grau de concordância kappa foi encontrado para a proteína rDyn-1 (0,977), peptídeos mistos (0,965), proteína rKDDR-plus (0,953), peptídeo K-plus 1 (0,930) e peptídeo Dyn-1 (0,893). A mistura de peptídeos apresentou a maior probabilidade (65,87). O ELISA usando a mistura de peptídeos e a proteína rDyn-1 apresentou alto desempenho para o sorodiagnóstico de CanL. Mais combinações de peptídeos e testes de campo estendidos adicionais com um tamanho de amostra maior são recomendados.