Application of rapid in vitro co-culture system of macrophages and T-cell subsets to assess the immunogenicity of dogs vaccinated with live attenuated Leishmania donovani centrin deleted parasites (LdCen −/− )
| dc.creator | Kelvinson Fernandes Viana | |
| dc.creator | Jacqueline Araújo Fiuza | |
| dc.creator | Sreenivas Gannavaram | |
| dc.creator | Ranadhir Dey | |
| dc.creator | Angamuthu Selvapandiyan | |
| dc.creator | Daniella Castanheira Bartholomeu | |
| dc.creator | Denise da Silveira-Lemos | |
| dc.creator | Lilian Lacerda Bueno | |
| dc.creator | Walderez Ornelas Dutra | |
| dc.creator | Ricardo Toshio Fujiwara | |
| dc.creator | Hira L. Nakhasi | |
| dc.creator | Rodolfo Cordeiro Giunchetti | |
| dc.date.accessioned | 2024-07-25T20:07:49Z | |
| dc.date.accessioned | 2025-09-09T00:19:01Z | |
| dc.date.available | 2024-07-25T20:07:49Z | |
| dc.date.issued | 2016 | |
| dc.description.abstract | Antecedentes: Parasitas Leishmania donovani vivos atenuados como LdCen-/- demonstraram conferir proteção imunidade contra a infecção por Leishmania em ratos, hamsters e cães. Forte imunogenicidade em cães vacinados com LdCen-/- foi relatado anteriormente, incluindo aumento da resposta de anticorpos favorecendo a resposta Th1 respostas linfoproliferativas, ativação de células T CD4+ e CD8+, aumento dos níveis de Th1 e redução de Th2 citocinas, além de uma redução significativa na carga parasitária após 18 e 24 meses após o parasita virulento desafio. Métodos: Visa validar um novo método utilizando sistemas de cocultura in vitro com macrófagos e CD4+ purificados ou CD8+ ou CD4+ :Células T CD8+ de cães imunizados com LdCen−/− e Leishmune® para avaliar a capacidade microbicida de macrófagos e o perfil de resposta imune como a produção de citocinas IFN-γ, TNF-α, IL-12, IL-4 e IL-10. Resultados e discussão: Nossos dados mostraram coculturas de macrófagos e células T purificadas de cães imunizados com LdCen−/− e desafiados com L. infantum foram capazes de identificar alta atividade microbicida, especialmente na cocultura utilizando células T CD4+, em comparação ao grupo Leishmune®. Da mesma forma, co-culturas com células T CD8+ ou CD4+ :Células T CD8+ em ambos os grupos experimentais foram capazes de detectar uma redução na carga parasitária em macrófagos infectados por L. infantum. Além disso, coculturas usando CD4+ ou CD8+ ou CD4+ :Células T CD8+ de cães imunizados com LdCen−/− e Leishmune® foi capaz de identificar níveis mais elevados de citocinas IFN-γ e IL-12, níveis reduzidos de IL-4 e IL-10 e maior Razão IFN-γ/IL-10. Embora os níveis mais elevados de IFN-γ e a relação IFN-γ/IL-10 tenham sido as marcas registradas do grupo LdCen-/- na cocultura usando células T CD4+, resultando em forte redução do parasitismo, a imunização Leishmune® apresentou um produção diferencial de TNF-α na cocultura usando CD4+ :Células T CD8+. Conclusão: As distintas condições dos sistemas de co-cultivo foram validadas e capazes de detectar a indução de proteção. O método descrito neste estudo aplicou uma abordagem nova e mais precisa e foi capaz de produzir resultados laboratoriais parâmetros úteis para testar e monitorar a imunogenicidade e eficácia das vacinas contra Leishmania em cães. | |
| dc.format.mimetype | ||
| dc.identifier.doi | https://doi.org/10.1186/s13071-016-1528-z | |
| dc.identifier.issn | 17563305 | |
| dc.identifier.uri | https://hdl.handle.net/1843/71559 | |
| dc.language | eng | |
| dc.publisher | Universidade Federal de Minas Gerais | |
| dc.relation.ispartof | Parasites & Vectors | |
| dc.rights | Acesso Aberto | |
| dc.subject | Vacina | |
| dc.subject | Técnicas In Vitro | |
| dc.subject | Linfócitos T CD8-Positivos | |
| dc.subject | Linfócitos T CD4-Positivos | |
| dc.subject | Cães | |
| dc.subject | Leishmaniose Visceral | |
| dc.subject.other | Vaccine | |
| dc.subject.other | In Vitro Techniques | |
| dc.subject.other | CD8-Positive T-Lymphocytes | |
| dc.subject.other | CD4-Positive T-Lymphocytes | |
| dc.subject.other | Canine | |
| dc.subject.other | Leishmaniasis | |
| dc.title | Application of rapid in vitro co-culture system of macrophages and T-cell subsets to assess the immunogenicity of dogs vaccinated with live attenuated Leishmania donovani centrin deleted parasites (LdCen −/− ) | |
| dc.title.alternative | Aplicação de co-cultura in vitro rápida sistema de macrófagos e subconjuntos de células T para avaliar a imunogenicidade de cães vacinado com Leishmania viva atenuada donovani centrin deletou parasitas (LdCen −/− ) | |
| dc.type | Artigo de periódico | |
| local.citation.issue | 250 | |
| local.citation.volume | 9 | |
| local.description.resumo | Background: Live attenuated Leishmania donovani parasites as LdCen−/− were shown to confer protective immunity against Leishmania infection in mice, hamsters, and dogs. Strong immunogenicity in dogs vaccinated with LdCen−/− has been previously reported, including increased antibody response favoring Th1 response lymphoproliferative responses, CD4+ and CD8+ T-cells activation, increased levels of Th1 and reduction of Th2 cytokines, in addition to a significant reduction in parasite burden after 18 and 24 months post virulent parasite challenge. Methods: Aimed at validating a new method using in vitro co-culture systems with macrophages and purified CD4+ or CD8+ or CD4+ :CD8+ T-cells of immunized dogs with both LdCen−/− and Leishmune® to assess microbicide capacity of macrophages and the immune response profile as the production of IFN-γ, TNF-α, IL-12, IL-4 and IL-10 cytokines. Results and discussion: Our data showed co-cultures of macrophages and purified T-cells from dogs immunized with LdCen−/− and challenged with L. infantum were able to identify high microbicidal activity, especially in the co-culture using CD4+ T-cells, as compared to the Leishmune® group. Similarly, co-cultures with CD8+ T-cells or CD4+ :CD8+ T-cells in both experimental groups were able to detect a reduction in the parasite burden in L. infantum infected macrophages. Moreover, co-cultures using CD4+ or CD8+ or CD4+ :CD8+ T-cells from immunized dogs with both LdCen−/− and Leishmune® were able to identify higher levels of IFN-γ and IL-12 cytokines, reduced levels of IL-4 and IL-10, and a higher IFN-γ/IL-10 ratio. While the highest IFN-γ levels and IFN-γ/IL-10 ratio were the hallmarks of LdCen−/− group in the coculture using CD4+ T-cells, resulting in strong reduction of parasitism, the Leishmune® immunization presented a differential production of TNF-α in the co-culture using CD4+ :CD8+ T-cells. Conclusion: The distinct conditions of co-culture systems were validated and able to detect the induction of immune protection. The method described in this study applied a new, more accurate approach and was able to yield laboratory parameters useful to test and monitor the immunogenicity and efficacy of Leishmania vaccines in dogs. | |
| local.publisher.country | Brasil | |
| local.publisher.department | ICB - DEPARTAMENTO DE MORFOLOGIA | |
| local.publisher.department | ICB - DEPARTAMENTO DE PARASITOLOGIA | |
| local.publisher.initials | UFMG | |
| local.url.externa | https://parasitesandvectors.biomedcentral.com/articles/10.1186/s13071-016-1528-z |