Fotoativação mobiliza pericitos e células de origem neural no reparo da polpa dentária
Carregando...
Data
Autor(es)
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Universidade Federal de Minas Gerais
Descrição
Tipo
Dissertação de mestrado
Título alternativo
Photoactivation mobilizes pericytes and cells of neural origin in the repair of dental pulp
Primeiro orientador
Membros da banca
Francine Benetti
Márcia Martins Marques
Márcia Martins Marques
Resumo
Introdução: O laser tem se mostrado capaz de fotoativar células-tronco endógenas induzindo sua diferenciação em múltiplos tecidos, além de modular processos inflamatórios e imunes em microambientes injuriados. Essa terapia é hoje chamada de terapia por fotobiomodulação (PBM) ou simplesmente fotoativação. Células da glia e pericitos – células perivasculares –, por sua vez, têm sido sugeridas como as principais células de reparo da polpa dentária. No entanto, os efeitos da PBM sobre essas células nunca foram explorados utilizando técnicas elegantes (state-of-art) de rastreamento, as quais poderiam prover informações relevantes sobre as interações do laser com os componentes celulares marcados. Objetivos: Este estudo visou verificar a capacidade estimuladora da PBM na mobilização de pericitos e células de origem neuralno reparo da polpa dentária após injúria tecidual in vivo. Para isso, foi utilizado um modelo murino(NG2-DsRed/Nestin-GFP) com transgene para pericitos (NG2) e células neurais indiferenciadas (Nestina). Métodos: As polpas dentárias dos primeiros molares superiores dos camundongos (n =12) foram expostas utilizando broca #1190F e lima K #20. O grupo PBM (n = 6) foi tratado imediatamente, 24h, 48h e 72h após a injúria com laser de diodo (InGaAlP; 660nm; 20mW; 5J/cm2; 0,71 W/cm2; 7s; modo contínuo e em contato) e o outro grupo foi mantido como controle(n = 6) sem qualquer tratamento. No 4º dia, os animais foram eutanasiados e os efeitos da aplicação da PBM sobre a mobilização dos pericitos e no reparo da polpa dentária foram verificados por microscopia confocal e por análises histológicas (H&E e azul de toluidina). Polpas dentárias saudáveis foram utilizadas como parâmetro de normalidade (n = 6). Os dados foram analisados pelo teste de ANOVA seguido pelo post-hoc de Tukey (α = 0,05). Resultados: A terapia promoveua mobilização significativa de pericitos e células indiferenciadas nos cornos pulpares coronários contíguos à região injuriada em relação ao controle (p<0,05). Além disso a PBM mostrou intensaproliferação de capilares terminais nos dentes fotoativados (p<0,05), enquanto manteve sinais de vitalidade pulpar nos terços coronários adjacentes à injúria. Embora não identificados na polpa dentária em nenhum grupo estudado, mastócitos puderam ser observados intactos ou degranuladosnos tecidos orais moles adjacentes ao dente fotoativado (p<0,05). Conclusão: A PBM estimulou a a neoformação da microvasculatura tecidual local e contribuiu para o influxo de células potentes para a região injuriada. A PBM pode ser considerada uma terapia adjuvante promissora em tratamentos endodônticos regenerativos da polpa dentária.
Abstract
Introduction: Laser light has proven to be capable of photoactivate endogenous stem
cells inducing their differentiation into multiple tissues, in addition to modulating
inflammatoryand immune processes in injured microenvironments. This therapy is now
called photobiomodulation therapy (PBM). Glial cells and pericytes – the perivascular
cells – have been identified as the true stem cells of our body. However, the effects of
PBM on these cells have never been explored using elegant (state-of-art) tracking
techniques, which could providerelevant information about the laser's interactions with
these labeled cellular components. Objectives: The goal of this study is to verify
the stimulating capacity of PBM in the mobilization of pericytes and other
endogenous cells in the repair of the dental pulp upon tissueinjury in vivo using a murine
model (NG2-DsRed/Nestin-GFP) with transgenes for pericytes (NG2) and
undifferentiated cells (Nestin). Methods: The dental pulps of the animals' first upper
molars (n = 12) were exposed using drill 3195 and K#20 file. The PBM group (n = 6)
was treated for 3 consecutive days with a diode laser (InGalP; 660nm; 20mW; 5J/cm2
;
0.71 W/cm2
;7s; continuous and in contact) and the other group was maintained as
control (n = 6) without any treatment. On the 4
th day, the animals were euthanized and
the effects of the application ofPBM on the mobilization of pericytes and on the dental
pulp repair were verified by confocal microscopy and histological analysis (H&E and
toluidine blue), respectively. Healthy dental pulps were used as a normality parameter
(n = 6). The data were analyzed by the ANOVA testfollowed by the Tukey's poshoc (α
= 0.05). Results: PBM showed an intense proliferation of terminal capillaries in the
photoactivated teeth (p<0.05), while signs of pup vitality were observed in the coronal
thirds adjacent to the injury site. In addition, the therapy promoted significant
mobilization of pericytes and undifferentiated cells in the coronary pulp horns
contiguous to the injury concerning the control group (p<0.05). Mast cells could not be
identified in the dental pulp of any of the studied groups but could be seen mostly
degranulated in the smooth tissues adjacent to the mesial root of the teeth of the
photoactivated group (p<0.05). Conclusion: PBM stimulates the pulp tissue
microvasculature neoformation and contributes to the influx of potent cells into the
injured site. PBM may be a promise adjunct tool in regenerative endodontic procedures
of the pulp tissue
Assunto
Fototerapia, Pericitos, Polpa dentária, Células mesenquimais estromais
Palavras-chave
Fotobiomodulação., Pericitos, Células-tronco mesequimais, Polpa dentária