Avaliação da capacidade imunomodulatória de peptídeos à partir de imunizações experimentais em camundongos

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Universidade Federal de Minas Gerais

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Tese de doutorado

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Membros da banca

Sebastião Rodrigo Ferreira
Luisa Mourão Dias Magalhães
Virgínia Mendes Russo Vallejos
Agostinho Gonçalves Viana

Resumo

As leishmanioses englobam um complexo grupo de doenças parasitárias negligenciadas que, de acordo com a Organização Mundial de Saúde (OMS), estão entre as enfermidades tropicais de maior importância. Inúmeras estratégias para o controle dessas doenças vêm sendo avaliadas, com destaque para o desenvolvimento de fármacos e vacinas. Embora essas sejam estratégias de grande impacto epidemiológico, ainda não há nenhuma vacina humana disponível, e os tratamentos quimioterápicos são tóxicos, longos e, muitas vezes, ineficazes. Parte dessas limitações é derivada da falta de conhecimento sobre os mecanismos imunológicos responsivos à doença e em relação a própria natureza e função dos compostos antigênicos e farmacológicos. Nesse sentido, este trabalho teve como objetivo catalogar, analisar e sintetizar peptídeos de Leishmania com melhores predições de epítopos e posteriormente avaliar as atividades imunomodulatórias que esses são capazes de estimular no modelo murino em imunização experimental. Para isso, à partir do banco de dados IEDB, foram selecionados epítopos antigênicos de espécies do gênero Leishmania que interagem com MHCI e sejam reconhecidos por receptores de linfócitos T. Tais peptídeos foram sintetizados em fase sólida e utilizados em ensaios de imunização em camundongos fêmeas da linhagem BALB/c, que posteriormente foram desafiados com formas infectantes de Leishmania infantum. Após a eutanásia e coleta de órgãos, observamos que os peptídeos antigenicos foram capazes de estimular altos niveis de IgG especificos, bem como potencial capacidade de estimular altos níveis IFN-γ. Tendo em vista a capacidade antigênica dos peptideos testados, as perspectivas desse trabalho incluem a otimização das formulações vacinais com diferentes adjuvantes e sistemas de entrega para potencializar a resposta imunológica, e a análise da eficácia protetora dos peptídeos em diversos modelos de infecção por Leishmania. Além disso, estudos adicionais poderiam investigar a aplicabilidade desses achados em, eventualmente, ensaios clínicos. Para as análises estatísticas foi utilizado o software GraphPad Prism 7 (GraphPad Inc, EUA), todos os testes foram considerados significativos quando apresentarem um valor de p < 0,05.

Abstract

Leishmaniasis encompasses a complex group of neglected parasitic diseases that, according to the World Health Organization (WHO), are among the most important tropical diseases. Numerous strategies for controlling these diseases are being evaluated, with emphasis on the development of drugs and vaccines. Although these strategies have significant epidemiological impact, there is still no available human vaccine, and chemotherapeutic treatments are toxic, lengthy, and often ineffective. Part of these limitations derives from the lack of knowledge about the immunological mechanisms responsive to the disease and the nature and function of the antigenic and pharmacological compounds. In this context, this study aimed to catalog, analyze, and synthesize Leishmania peptides with the best epitope predictions and subsequently evaluate the immunomodulatory activities these peptides can stimulate in a murine model through experimental immunization. To achieve this, antigenic epitopes from Leishmania species that interact with MHCI and are recognized by T lymphocyte receptors were selected from the IEDB database. These peptides were synthesized in solid phase and used in immunization assays in female BALB/c mice, which were later challenged with infective forms of Leishmania infantum. After euthanasia and organ collection, we observed that the antigenic peptides were capable of stimulating high levels of specific IgG as well as a significant ability to stimulate high levels of IFN-γ. Given the antigenic capacity of the tested peptides, the prospects of this work include optimizing vaccine formulations with different adjuvants and delivery systems to enhance the immune response and analyzing the protective efficacy of the peptides in various models of Leishmania infection. Additionally, further studies could investigate the applicability of these findings in eventual clinical trials. For statistical analyses, GraphPad Prism 7 software (GraphPad Inc, USA) was used, and all tests were considered significant when they had a p-value < 0.05.

Assunto

Leishmaniose, Vacinas, Peptídeos, Antígenos, Dissertação Acadêmica

Palavras-chave

Leishmanioses, Peptídeos, Imunomodulação, Vacinas

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