Cinética da proliferação e migração de fibroblastos isolados a partir da pele de couro cabeludo de neonatos e lactentes com hidrocefalia
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Universidade Federal de Minas Gerais
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Resumo
Introdução: A fístula cutânea e deiscência de sutura são complicações que podem
ocorrer no pós-operatório de derivações liquóricas de crianças com hidrocefalia. Na
literatura já é conhecida uma maior prevalência destas complicações abaixo de seis
meses de vida e que a cicatrização difere conforme a idade. Objetivo: Avaliar a taxa
de proliferação e migração de fibroblastos isolados da pele de couro cabeludo de
neonatos e lactentes operados com hidrocefalia, considerando também o estado
nutricional. Casuística e Método: Foram realizadas biópsias de pele do couro
cabeludo de crianças, quando submetidas a tratamento cirúrgico de hidrocefalia.
Foram cultivados e testados os fibroblastos das seguintes triplicatas: 3 neonatos
nutridos, 3 neonatos desnutridos, 3 lactentes até 6 meses de vida nutridos e 3
lactentes até 6 meses de vida. Na quarta passagem (P4) foram realizados os ensaios.
Foi construída a curva de crescimento celular através da contagem direta, avaliada a
viabilidade celular por método colorimétrico da metabolização pelos fibroblastos do
MTT (brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difeniltetrazólio), e a velocidade de
migração dos fibroblastos medida através do cálculo das áreas de preenchimentos de
ferida (scratch) nas placas de cultura, em fotografias. Resultado: Os fibroblastos dos
neonatos têm uma capacidade inicial de proliferação mais rápida em relação aos
lactentes, e logo atingem um platô, assumindo uma curva de crescimento sigmoide.
Os lactentes apresentam uma curva exponencial de crescimento. A desnutrição
reduziu a velocidade de crescimento, quando neonatos. Não houve diferença
significativa na metabolização do MTT em todos os grupos. A taxa de migração foi
semelhante para cada faixa etária, mas quanto ao momento cirúrgico, novamente o
grupo operado antes de um mês de vida migrou significativamente mais lento.
Conclusão: Os fibroblastos extraídos no primeiro mês de vida, in vitro, tem
comportamento diferente em relação aos lactentes até 6 meses, com uma velocidade
menor de proliferação e migração. As circunstâncias envolvidas no caso de falha da
cicatrização nos levam a evitar a cirurgia no primeiro mês de vida e postergar por um
tempo maior que o habitual a retirada dos fios de sutura.
Abstract
Introduction: Cerebrospinal fluid wound leakage and suture dehiscence are
complications that can occur in the postoperative period of cerebrospinal fluid shunts
from hydrocephalic infants. In the literature, it is already known a higher prevalence of
these complications below one year of life and that cicatrization differs acording to age.
Objetives: To evaluete the rate of proliferation and migration of fibroblast in neonates,
compared to infants, operated on hydrocephalus, also observing nutritional status.
Material and Method: Skin biopsies from the scalp of newborns and infants were
performed during hydrocephalus surgery of different etiologies. The skins were treated
and cultured. In the fourth passage tests were carried out. The cell growth curve was
constructed, the cell viability that was measured by the metabolism of MTT (3- (4,5
dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide) at pre-established times and
the rate of fibroblast migration by measuring fills of scratch on the culture plate,
calculated from photographs. The triplicates were: 3 nourished newborns operated at
1 month of age, 3 malnourished newborns operated at 1 month of age, 3 nourished
infants operated between 1 and 6 months of life, and 3 malnourished infants operated
between 1 and 6 months of life. Results: The cellular growth of the groups operated
before one month of life behaved significantly differently when compared to those
operated after the first month of life. The fibroblasts of children operated before one
month of life had a sigmoid growth profile and those operated from one month an
exponential profile. Nutritional status influenced cell growth. There was no significant
difference in the metabolism of MTT, that is, cell viability, considering age and nutrition.
About the migration ability, shows that children fibroblast of the same age group
behaves in a similar way, but when compared to the surgical moment, again the group
operated before one month of life migrates significantly slower. Conclusion: Neonatal
fibroblasts have an initial doubling capacity similar to infants, but they lose this ability
more rapidly. Malnutrition affects the growth rate in the first month of life. The neonatal
fibroblast is slower in the first 24 hours, considering the migration. The metabolic
pathways responsible for these results should be studied, and we advise that if
possible children should be operated on after the first month of life or operative points
should be maintained longer than usual when operated in the first month of life.
Assunto
Cicatrização, Hidrocefalia, Fibroblastos, Fístula Cutânea, Recém-Nascido, Dissertação Acadêmica
Palavras-chave
Hidrocefalia, Cicatrização, Fibroblastos, Fístula cutânea, Recém nascido
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