Triagem antiviral de espécies vegetais frente ao coronavírus MHV-3 e estudo fitoquímico de Terminalia phaeocarpa EICHLER Belo Horizonte 2025.
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Data
Autor(es)
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Editor
Universidade Federal de Minas Gerais
Descrição
Tipo
Tese de doutorado
Título alternativo
Primeiro orientador
Membros da banca
Vivian Vasconcelos Costa Litwinski
José Hugo de Sousa Gomes
Alisson Samuel Portes Caldeira
Vera Lúcia de Almeida
José Hugo de Sousa Gomes
Alisson Samuel Portes Caldeira
Vera Lúcia de Almeida
Resumo
A disseminação do coronavírus SARS-CoV-2 para todos os continentes resultou na pandemia de COVID-19, responsável por mais de 7,1 milhões de mortes em todo o mundo. O desenvolvimento de novos fármacos antivirais é essencial para o controle de viroses atuais e emergentes, e os produtos naturais representam uma estratégia promissora para esse propósito. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antiviral de extratos frente ao betacoronavírus MHV-3 e realizar o estudo fitoquímico de um extrato ativo selecionado, visando isolar os constituintes antivirais. Foram selecionados para triagem 14 extratos de plantas pertencentes a cinco famílias botânicas, priorizando espécies ricas em polifenóis complexos e/ou em flavonoides com padrão de oxigenação pouco usual e/ou com atividade anti-inflamatória e/ou antiviral descrita na literatura. Inicialmente foi avaliada in vitro a citotoxicidade dos extratos e todos eles apresentaram viabilidade celular superior a 80% nas concentrações de 10 e 30 μg/mL, exceto o extrato de Baccharis maxima. A atividade antiviral foi avaliada in vitro em células L929 infectadas com MHV-3, sendo os extratos administrados antes e após a infecção. O efeito antiviral foi determinado pelo ensaio de redução da formação de placas de lise. Observou-se redução do título viral após tratamento com os extratos de Baccharis grandmucromata (0,12 e 0,27 log de redução) e Terminalia phaeocarpa (0,93 e 2,64 log de redução). O extrato de T. phaeocarpa foi submetido a fracionamento preliminar por partição entre solventes imiscíveis e a atividade antiviral das frações resultantes (n-hexânica, diclorometânica, em acetato de etila e hidrometanólica) foi ensaiada em concentrações não citotóxicas em células L929 infectadas com MHV-3. Todas as frações reduziram o título viral nas concentrações avaliadas (0,59 a 2,8 log de inibição), sendo a fração n-hexânica a mais ativa. A composição química do extrato e das frações ativas foi avaliada por HPLC-PDA, indicando a presença de compostos fenólicos. A fração n-hexânica foi refracionada por cromatografia em coluna aberta de sílica gel flash. Dois grupos de frações reunidas, de menor polaridade, possuindo aspectos graxosos (CFJ10 r CFJ12) e tiveram sua composição química analisada por GC-MS. As análises indicaram tratar-se de misturas, sendo identificados 7 hidrocarbonetos, um triterpeno e um fitoesterol. Dois sólidos brancos (RFJ900 e RFJ1135) resultantes do refracionamento foram analisados por RMN de 1H e de 13C, possibilitando identificá-los inequivocamente como β-sitosterol e β-amirina. A atividade antiviral do extrato de T. phaeocarpa e das frações obtidas, foi confirmada em células humanas Calu-3 infectadas com SARS-CoV-2, com reduções de 0,56–2,31 log do título viral, sendo as frações diclorometânica e em acetato de etila as mais ativas. O perfil químico registrado por HPLC-PDA indicou predominância de compostos fenólicos. O estudo fitoquímico da fração acetato de etila levou ao isolamento de dois flavonoides monoglicosilados: quercitrina (quercetina-3-O-α-L-ramnosídeo) e afzelina (canferol-3-O-α-L-ramnosídeo), identificadas por análises de UPLC-PDA-ESI-MS/MS e RMN de ¹H e de ¹³C, com experimentos mono e bidimensionais. A ocorrência de quercitrina, afzelina, β-sitosterol e β-amirina em T. phaeocarpa é aqui descrita pela primeira vez, bem dos hidrocarbonetos identificados. Estudos in silico anteriores indicam que os compostos isolados e identificados são potenciais ligantes de proteínas-chave do SARS-CoV-2, sugerindo sua participação na atividade antiviral observada. Em conclusão, os resultados obtidos demonstram o potencial de T. phaeocarpa como fonte de constituintes com ação antiviral.
Abstract
Assunto
Palavras-chave
MHV-3, SARS-CoV-2, Terminalia phaeocarpa, Flavonoides, Triterpenos